Село Черкизово известно с XIV века. Согласно местной легенде, здесь в 1350 году родился святой благоверный князь Дмитрий Донской. В 1592 году на средства князя Бориса Черкасского была построена деревянная церковь в честь Собора Пресвятой Богородицы.
В 1734 году, по инициативе Петра Борисовича Черкасского, началось строительство каменной церкви Успения Пресвятой Богородицы. Предполагается, что проект разработал архитектор Александр Федорович Путилов. Строительство продолжалось до 1749 года, когда церковь была освящена. Первым священником был Федор Никифоров. Архитектурно храм напоминал четырехлепестковый цветок и был украшен сложным иконостасом с кипарисовыми дверями.
В 1821 году церковь была перестроена в классическом стиле. Была пристроена просторная трапезная с двумя приделами, а небольшая звонница соединена с основным зданием. С этого времени храм стал приходским, а к нему приписали и ранее существовавшую деревянную церковь Собора Пресвятой Богородицы. В 1854 году к церкви пристроили Знаменский придел, а в 1856–1859 годах — придел во имя святых князей Бориса и Глеба.
В советский период церковь, как и многие другие, подверглась закрытию. В 1930-е годы начались гонения на черкизовскую общину. Известно, что в 1937 году был репрессирован потомственный диакон Павел Васильевич Некрасов, чей род более 120 лет служил в храмах Черкизова. В 1947 году разобрали деревянную церковь Собора Пресвятой Богородицы; из ее бревен построили клуб, сгоревший в 1958 году. В Успенской церкви также располагался клуб. В 1960-е годы разрушили колокольню и главку, пытались тракторами растащить алтарную колоннаду.
В 1992 году руины храма вернули православной общине, и с 1994 года под руководством протоиерея Димитрия Дудко начались восстановительные работы. В 2003 году открыли новое здание клуба. В 2014 году началась реставрация сохранившегося флигеля усадьбы, построенного в советское время, в котором ранее находились детский дом и дом инвалидов.
