В XVII веке в селе Радушино была возведена деревянная церковь Рождества Пресвятой Богородицы. В приправочной книге от 1616 года упоминается: «...в селе церковь Рождества Пречистые Богородицы древена клетцки...» Однако в 1770 году эта деревянная церковь была разобрана из-за ветхости.
В 1772 году на её месте была построена каменная церковь Рождества Пресвятой Богородицы с приделом во имя апостола и евангелиста Иоанна Богослова. Архитектурный стиль храма представляет собой провинциальное барокко с ярусной колокольней. Церковь была окружена каменной оградой с шестью башнями и воротами, сооружёнными в 1872 году на средства князя А.Д. Волконского.
В 1888 году при храме была открыта церковно-приходская школа, а в 1930-е годы церковь была закрыта. Несмотря на попытки разрушения, храм сохранился, хотя и использовался не по назначению.
В 1998 году церковь была возвращена верующим, и с 2004 года начались ремонтно-восстановительные работы, которые были полностью завершены. В настоящее время территория вокруг храма благоустроена, а внутри обновлены росписи и установлен новый иконостас.
Архитектурно, церковь представляет собой бесстолпный четверик с притвором, увенчанный световым барабаном на высоком сомкнутом своде. Колокольня состоит из двух четвериков и восьмерика с приподнятой криволинейной кровлей, завершающейся шпилем. Внутри храма сохранились элементы отделки, характерные для архитектуры XVIII века.