Храм во имя святителя Амвросия Медиоланского в Милане был учрежден 27 марта 2005 года решением Священного Синода Русской Православной Церкви как второй приход Московского Патриархата в городе после прихода святых Сергия Радонежского, Серафима Саровского и мученика Викентия. Приход включен в состав Корсунской епархии.
Первоначально община совершала богослужения в часовне Католического университета Святого Сердца, затем с 2006 года — в храме Сан-Карло ал Лазаретто. 20 июля 2007 года миланская курия передала общине храм Сан-Вито аль Пасквироло, где богослужения совершаются по настоящее время.
Храм Сан-Вито аль Пасквироло имеет древнюю историю. Первое упоминание о церкви на этом месте относится к началу XII века. Храм был посвящен мученику Виту Медиоланскому, чья почитаемая икона находилась здесь до её утраты. В XVI веке на средства прихожан был устроен главный алтарь в честь мученика Вита. В 1621-1625 годах храм был капитально перестроен в классическом стиле.
В период наполеоновских войн храм, как и многие другие церкви Северной Италии, был закрыт. Богослужения возобновились после падения Наполеона. В 1925 году приход был упразднен в связи с оттоком населения из центра города. В 1960-х годах храм был отреставрирован на средства семьи Фальк и Фонда Джузеппе Лаццати, после чего перешел в собственность миланской курии. Очередная реставрация завершилась в 2001 году.
Архитектурный облик храма относится преимущественно к XVII веку. В интерьере сохранились элементы более ранних периодов. В 2007 году здание было передано православной общине, что ознаменовало новый этап в истории этого храмового комплекса.